液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異，對混合物進行先分離，而后分析鑒定的儀器。對高沸點、難氣化化合物的混合物通過色譜柱和淋洗劑實現(xiàn)分離。由于HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、分離效率高、色譜柱可反復(fù)利用，流出組分易收集等優(yōu)點，因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機分析、石油化工等各種領(lǐng)域。

LC210液相色譜儀

1、恒度洗脫

　　一定是將水相與有機相混合后、抽濾（使用混合型過濾膜），用一個管路（如A管）泵入儀器，這是使用的原則。切勿因節(jié)約有機相、便于摸索色譜條件等原因而使用兩個管路(一個純水相、一個純有機相)泵入儀器，即便配制了脫氣機，因為這樣極易造成水相中鹽和表面活性劑的少量析出。

　　剩余流動相完全可繼續(xù)使用，密封后放置陰涼處，待下次試驗時與新配制的流動相混合后抽濾即可。無需擔心發(fā)霉、無機鹽析出、揮發(fā)、比例不準等問題。

2、梯度洗脫

　　流動相配制最為科學(xué)的方式是：A相為高比例的水相-低比例的有機相、B相為低比例的水相-高比例的有機相。其次為：A相為高比例的水相-低比例的有機相、B相為純有機相。最不科學(xué)的為：A相為純水相、B相為純有機相，如既有質(zhì)量標準采用了此種方式，建議改為第二種或第一種方式，否則基線漂移嚴重，難以進行穩(wěn)定的雜質(zhì)檢測。

梯度洗脫結(jié)束后，建議經(jīng)5分鐘回到初始狀態(tài)，再平衡5分鐘后開始下一針測定。注意這10分鐘的穩(wěn)定極為關(guān)鍵。切勿短時間內(nèi)回到初始狀態(tài)，會對儀器和色譜柱損傷較大。

3、水相中的溶質(zhì)溶解方式

　　水相中需溶解的無機鹽和表面活性劑等固體溶質(zhì)，建議采用加熱法，不建議采用振搖、超聲等方式。不當方式的溶解，溶質(zhì)可能處于“臨界膠團濃度”，其后一旦遇到某特殊情形(如遇有機溶劑、溫度劇降等)，極易析出少量結(jié)晶。而一旦析出，便將損傷儀器和色譜柱，呈現(xiàn)泵頭處析出“鹽和白粉”的現(xiàn)象。

4、注意事項

如需使用正相系統(tǒng)，一定要單獨采用一臺儀器(如二手的或較為破舊的)，切勿采用異丙醇轉(zhuǎn)換，此舉對儀器損傷極大。

正相所使用的流動相(如正己烷、環(huán)己烷等)，無需抽濾，混勻超聲后即可使用。