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使用熒光分光光度計(jì)讀數(shù)時(shí)要注意什么?
點(diǎn)擊: 次 時(shí)間:2022-01-07 15:16
使用熒光分光光度計(jì)要讀數(shù)時(shí),建議在熒光發(fā)射峰的最高示值處讀取數(shù)值。當(dāng)尋找最高示值時(shí)要仔細(xì)調(diào)整波長旋鈕,觀察波長時(shí)目光要垂直于波長指示窗。還要注意當(dāng)熒光值過高時(shí),為了保護(hù)光電倍增管,儀器靈敏度會(huì)自動(dòng)調(diào)低。調(diào)整靈敏度時(shí)整機(jī)自動(dòng)靈敏度系統(tǒng)重調(diào)將影響原設(shè)定的熒光零位,調(diào)整靈敏度后請(qǐng)檢查零位,如有變化可重調(diào)零位一次。
下面以上海棱光F95S熒光分光光度計(jì)測(cè)試10-6g/mL 硫酸奎寧為例進(jìn)行說明。
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1、按下儀器總電源開關(guān)。
2、主機(jī)預(yù)熱 30 分鐘。
3、按“模式”選擇鍵,進(jìn)入主菜單界面,選擇執(zhí)行熒光值測(cè)定功能。
4、準(zhǔn)備樣品
熒光樣品池一盛稀硫酸作參比(或試劑空白),熒光樣品池二裝入樣品溶液
(10-6g/mL 硫酸奎寧),然后用擦鏡紙將四壁擦試干凈。
5、調(diào)整波長
旋轉(zhuǎn)波長調(diào)節(jié)旋鈕,至標(biāo)準(zhǔn)樣品熒光發(fā)射光譜峰值波長處(調(diào)至450nm附近)。
6、靈敏度設(shè)定
打開樣品室蓋,樣品池二置入樣品座上,合上樣品室蓋。然后按“歸一”調(diào)整鍵,調(diào)節(jié)至LCD液晶顯示窗顯示熒光值顯示在10-100左右之間,記下此時(shí)的靈敏度檔位。
7、調(diào)零
打開樣品室蓋,樣品池一置入樣品座上,合上樣品室蓋。然后按“調(diào)零”調(diào)整鍵,儀器自動(dòng)調(diào)整0%,至LCD液晶顯示窗顯示0.0±0.1%止。如發(fā)現(xiàn) 0%有漂移,繼續(xù)按下“調(diào)零”調(diào)整鍵,直至LCD 液晶顯示窗顯示 0.0±0.1%為止。
8、放入待測(cè)樣品
置入樣品及樣品定位:打開樣品室蓋,將已裝入樣品(10-6g/mL 硫酸奎寧)的石英熒光樣品池二放入樣品室內(nèi)樣品座上。
9、讀數(shù)
旋轉(zhuǎn)波長調(diào)節(jié)旋鈕,調(diào)至450nm附近時(shí)的最高顯示值,至LCD液晶顯示窗顯示的數(shù)值穩(wěn)定下來之后即可讀取熒光值和波長值。波長值由旋鈕左側(cè)的波長指示窗顯示,讀波長時(shí)目光垂直觀察,以減少讀數(shù)誤差。
10、關(guān)閉儀器總電源開關(guān)。
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