以棱光F95S熒光分光光度計(jì)為例，說明使用標(biāo)準(zhǔn)曲線法對(duì)樣品定量的具體步驟。

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1、按下儀器總電源開關(guān)。

2、主機(jī)預(yù)熱 30 分鐘。

3、準(zhǔn)備樣品

熒光樣品池一盛蒸餾水或去離子水作參比（或試劑空白、參比溶液）。再取已知含量的標(biāo)準(zhǔn)樣品，按規(guī)范流程配置系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，如按濃度從低到高標(biāo) A、B、C、D等。然后把這些配置好的標(biāo)準(zhǔn)溶液中濃度最高的標(biāo)準(zhǔn)溶液注入樣品池二中。

4、旋轉(zhuǎn)“波長(zhǎng)”調(diào)節(jié)旋鈕，至標(biāo)準(zhǔn)樣品熒光發(fā)射光譜峰值波長(zhǎng)處。

5、按“模式”選擇鍵，進(jìn)入主菜單界面，選擇執(zhí)行“熒光值”測(cè)定功能。

6、靈敏度設(shè)定

打開樣品室蓋，樣品池二置入樣品座上，合上樣品室蓋。然后按“歸一”調(diào)整鍵，調(diào)節(jié)至LCD液晶顯示窗顯示熒光值顯示在 10-100 左右之間，記下此時(shí)的靈敏度檔位。

7、調(diào)零

打開樣品室蓋，樣品池一置入樣品座上，合上樣品室蓋。然后按“調(diào)零”調(diào)整鍵，儀器自動(dòng)調(diào)整0%，至LCD液晶顯示窗顯示0.0±0.1%止。如發(fā)現(xiàn)0%有漂移，繼續(xù)按下調(diào)零調(diào)整鍵，直至LCD液晶顯示窗顯示 0.0±0.1%為止。

8、放入標(biāo)準(zhǔn)樣品

打開樣品室蓋，取出樣品池一，然后倒掉樣品池二中的溶液，清洗干凈后注入配置好的標(biāo)準(zhǔn)樣品A，然后將樣品池二置入樣品室內(nèi)的樣品座，合上樣品室蓋。

9、讀數(shù)

等數(shù)值穩(wěn)定下來之后顯示的數(shù)值就是該待測(cè)樣品的熒光值，由LCD液晶顯示窗讀出儀器測(cè)得的樣品熒光值，并記錄。

10、重復(fù)執(zhí)行上述8、9步驟，逐個(gè)記錄B、C、D等每個(gè)標(biāo)樣的熒光值。

11、取待測(cè)樣品

取待測(cè)濃度樣品，經(jīng)稀釋搖勻，注入用蒸餾水或去離子水洗滌后的熒光樣品池二。

12、放入待測(cè)樣品并讀數(shù)

打開樣品室蓋，將裝有待測(cè)樣品樣品池二置入樣品座上，合上樣品室蓋。待LCD液晶顯示窗顯示的數(shù)值穩(wěn)定下來之后讀出儀器測(cè)得的待測(cè)樣品熒光值，并做記錄。

13、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線

取坐標(biāo)紙，以 X 軸為濃度坐標(biāo)(范圍：0～試樣最大濃度值)，以 Y 軸為熒光值坐標(biāo)(范圍：0～測(cè)量的最大熒光值)。按測(cè)量誤差要求取軸上的值。在圖上找出各個(gè)對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度和相應(yīng)熒光值的坐標(biāo)點(diǎn)，并用一直線通過四個(gè)坐標(biāo)點(diǎn)，或使坐標(biāo)點(diǎn)均勻分布在直線兩邊，并使點(diǎn)到直線間的距離最小。

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14、獲取待測(cè)樣品的濃度

由標(biāo)準(zhǔn)曲線表Y軸熒光值坐標(biāo)定位待測(cè)樣品濃度值位置，獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線表X軸濃度坐標(biāo)相應(yīng)點(diǎn)的濃度值。

15、繼續(xù)測(cè)定其它樣品，或關(guān)閉儀器總電源開關(guān)。