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可見分光光度計的原理是什么
點擊: 次 時間:2021-12-10 10:38
上海儀電分析可見分光光度計系列,產(chǎn)品咨詢請致電13513512998
國產(chǎn)可見分光光度計采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時,被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關(guān)系如下式:A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中:A為吸光度;I為透射的單色光強度; I0為入射的單色光強度;T為物質(zhì)的透射率;k為摩爾吸收系數(shù);L為被分析物質(zhì)的光程,即比色皿的邊長;c為物質(zhì)的濃度。
物質(zhì)對光的選擇性吸收波長,以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液,測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū)除某些物質(zhì)對光有吸收外,很多物質(zhì)本身并沒有吸收,但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測定時應(yīng)用標準品或?qū)φ掌吠瑫r操作。
國產(chǎn)可見分光光度計目前已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器,主要用于檢定物質(zhì)、與標準物及標準圖譜對照、比較吸收波長吸收系數(shù)的一致性、純度檢驗、推測化合物的分子結(jié)構(gòu)、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定。
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