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使用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)時(shí)如何進(jìn)行參數(shù)條件的選擇
點(diǎn)擊: 次 時(shí)間:2017-08-31 10:44
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)常見(jiàn)技術(shù)參數(shù)包括波長(zhǎng)、狹縫寬度、吸光度等,在使用時(shí)如何選擇這些工作參數(shù)呢?
1、測(cè)量波長(zhǎng)
在定量分析中,為了提高測(cè)定的靈敏度,入射光的波長(zhǎng)應(yīng)選擇被測(cè)物的最大吸收波長(zhǎng)λmax,如果λmax有干擾,可選擇另一條靈敏度稍低、但能避免干擾的譜線(xiàn)。所以,適當(dāng)選擇入射光的波長(zhǎng),不僅能提高測(cè)定的靈敏度,還能提高測(cè)定的準(zhǔn)確度。
2、狹縫寬度
狹縫寬度過(guò)大,入射光的單色性差;狹縫寬度太小,入射光的強(qiáng)減弱。狹縫寬度過(guò)大或過(guò)小均會(huì)造成靈敏度降低,最佳選擇是產(chǎn)生最小誤差情下的最大狹縫。
一般選用儀器的狹縫寬度應(yīng)小于待測(cè)樣品吸收帶的半寬度,否則測(cè)得的吸光度值會(huì)偏低。
狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸光度不再加為準(zhǔn)。對(duì)于大部分被測(cè)品種,可以使用2nm縫寬。
3、控制適當(dāng)?shù)奈舛确秶?nbsp;
可通過(guò)控制被測(cè)物濃度或改變吸收池厚度來(lái)實(shí)現(xiàn)吸光度合理的范圍,以盡量減小測(cè)量誤差。
一般吸光度盡量控制在0.1-0.8范圍。
4、空白溶液的選擇
空白溶液是用來(lái)調(diào)節(jié)吸光度測(cè)量工作零點(diǎn),即A=0,T=100%的溶液,以消除溶液中其它基體組分以及吸收池和溶劑對(duì)入射光的反射和吸收所帶來(lái)的誤差。根據(jù)情況不同,常用的空白溶液有如下幾種選擇:
①溶劑空白
當(dāng)溶液中只有待測(cè)組分在測(cè)定波長(zhǎng)下有吸收,而其它組分無(wú)吸收時(shí),可用純?nèi)軇┳骺瞻住?nbsp;
②試劑空白
如果顯色劑或其它試劑有吸收,而待測(cè)試樣溶液無(wú)吸收,則用不加待測(cè)組分的其它試劑作空白。
③試樣空白
如果試樣基體有吸收,而顯色劑或其它試劑無(wú)吸收,則用不加顯色劑的試樣溶液作空白。
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1、測(cè)量波長(zhǎng)
在定量分析中,為了提高測(cè)定的靈敏度,入射光的波長(zhǎng)應(yīng)選擇被測(cè)物的最大吸收波長(zhǎng)λmax,如果λmax有干擾,可選擇另一條靈敏度稍低、但能避免干擾的譜線(xiàn)。所以,適當(dāng)選擇入射光的波長(zhǎng),不僅能提高測(cè)定的靈敏度,還能提高測(cè)定的準(zhǔn)確度。
2、狹縫寬度
狹縫寬度過(guò)大,入射光的單色性差;狹縫寬度太小,入射光的強(qiáng)減弱。狹縫寬度過(guò)大或過(guò)小均會(huì)造成靈敏度降低,最佳選擇是產(chǎn)生最小誤差情下的最大狹縫。
一般選用儀器的狹縫寬度應(yīng)小于待測(cè)樣品吸收帶的半寬度,否則測(cè)得的吸光度值會(huì)偏低。
狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸光度不再加為準(zhǔn)。對(duì)于大部分被測(cè)品種,可以使用2nm縫寬。
3、控制適當(dāng)?shù)奈舛确秶?nbsp;
可通過(guò)控制被測(cè)物濃度或改變吸收池厚度來(lái)實(shí)現(xiàn)吸光度合理的范圍,以盡量減小測(cè)量誤差。
一般吸光度盡量控制在0.1-0.8范圍。
4、空白溶液的選擇
空白溶液是用來(lái)調(diào)節(jié)吸光度測(cè)量工作零點(diǎn),即A=0,T=100%的溶液,以消除溶液中其它基體組分以及吸收池和溶劑對(duì)入射光的反射和吸收所帶來(lái)的誤差。根據(jù)情況不同,常用的空白溶液有如下幾種選擇:
①溶劑空白
當(dāng)溶液中只有待測(cè)組分在測(cè)定波長(zhǎng)下有吸收,而其它組分無(wú)吸收時(shí),可用純?nèi)軇┳骺瞻住?nbsp;
②試劑空白
如果顯色劑或其它試劑有吸收,而待測(cè)試樣溶液無(wú)吸收,則用不加待測(cè)組分的其它試劑作空白。
③試樣空白
如果試樣基體有吸收,而顯色劑或其它試劑無(wú)吸收,則用不加顯色劑的試樣溶液作空白。
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