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吸光光度法和熒光分析法有什么區(qū)別

點(diǎn)擊: 次 時(shí)間:2017-08-15 11:13

    紫外-可見吸收光譜法是根據(jù)溶液中物質(zhì)的分子或離子對(duì)紫外和可見光譜區(qū)輻射能的吸收來研究物質(zhì)的組成和結(jié)構(gòu)的方法,而熒光分析法是由于處于第一激發(fā)單重態(tài)最低能級(jí)的分子以輻射躍遷的形成返回基態(tài)各振動(dòng)能級(jí)時(shí)產(chǎn)生的熒光的分析方法,兩者的區(qū)別在于前者研究的是吸收光譜,且電子躍遷為激發(fā)態(tài)的振動(dòng)能級(jí)到基態(tài)的振動(dòng)能級(jí)間的躍遷。
    熒光分析法的靈敏度高,其檢出限通常比分光光度法低2~4個(gè)數(shù)量級(jí),選擇性也比分光光度法好,這是由于:
a 熒光分析儀器在與激發(fā)光相垂直的方向測(cè)量熒光,與分光光度在一直線上測(cè)量相比,消除了透射光的影響,測(cè)量更為準(zhǔn)確,靈敏度高;
b 吸光光度法只采用一個(gè)單色器,而熒光分析儀器有兩個(gè)單色器,分別用于獲得單色性較好的激發(fā)光和分出某一波長(zhǎng)的熒光,消除其它雜散光的干擾,其儀器的準(zhǔn)確度、靈敏度也更高;
c 熒光測(cè)量中的激發(fā)光源比吸收光度法的光源有更大的發(fā)射強(qiáng)度,光源更穩(wěn)定,因此其儀器的準(zhǔn)確度、靈敏度也就更高。
    綜上所述,熒光分光光度計(jì)熒光法的檢出限優(yōu)于吸光光度法。
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