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滅菌后的培養(yǎng)基存放時(shí)間和保存方式是什么
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一、瓊脂培養(yǎng)基的融化
將培養(yǎng)基放到沸水浴中或采用有相同效果的方法(如高壓鍋中的層流蒸汽)使之融化。經(jīng)過高壓的培養(yǎng)基應(yīng)盡量減少重新加熱時(shí)間,融化后避免過度加熱。融化后應(yīng)短暫置于室溫中(如2 min)以避免玻璃瓶破碎。
融化后的培養(yǎng)基放入47℃~50℃的恒溫水浴鍋中冷卻保溫(可根據(jù)實(shí)際培養(yǎng)基凝固溫度適當(dāng)提高水浴鍋溫度),直至使用,培養(yǎng)基達(dá)到47℃~50℃的時(shí)間與培養(yǎng)基的品種、體積、數(shù)量有關(guān)。融化后的培養(yǎng)基應(yīng)盡快使用,放置時(shí)間一般不應(yīng)超過4 h。未用完的培養(yǎng)基不能重新凝固留待下次使用。敏感的培養(yǎng)基尤應(yīng)注意,融化后保溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,如有特定要求可參考指定的標(biāo)準(zhǔn)。
傾注到樣品中的培養(yǎng)基溫度應(yīng)控制在約45℃左右。
二、平板的制備和儲(chǔ)存
傾注融化的培養(yǎng)基到平皿中,使之在平皿中形成厚度至少為3 mm(直徑90 mm的平皿,通常要加入18 mL~20 mL瓊脂培養(yǎng)基)。將平皿蓋好皿蓋后放到水平平面使瓊脂冷卻凝固。如果平板需儲(chǔ)存,或者培養(yǎng)時(shí)間超過48 h或培養(yǎng)溫度高于40 ℃,則需要傾注更多的培養(yǎng)基。凝固后的培養(yǎng)基應(yīng)立即使用或存放于暗處和(或)5℃±3℃冰箱的密封袋中,以防止培養(yǎng)基成分的改變。在平板底部或側(cè)邊做好標(biāo)記,標(biāo)記的內(nèi)容包括名稱、制備日期和(或)有效期。也可使用適宜的培養(yǎng)基編碼系統(tǒng)進(jìn)行標(biāo)記。
將倒好的平板放在密封的袋子中冷藏保存可延長儲(chǔ)存期限。為了避免冷凝水的產(chǎn)生,平板應(yīng)冷卻后再裝入袋中。儲(chǔ)存前不要對(duì)培養(yǎng)基表面進(jìn)行干燥處理。
對(duì)于采用表面接種形式培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基,應(yīng)先對(duì)瓊脂表面進(jìn)行干燥:揭開平皿蓋,將平板倒扣于烘箱或培養(yǎng)箱中(溫度設(shè)為25℃~50℃);或放在有對(duì)流的無菌凈化臺(tái)中,直到培養(yǎng)基表面的水滴消失為止。注意不要過度干燥。
商品化的平板瓊脂培養(yǎng)基應(yīng)按照廠商提供的說明使用。
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