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微量比色皿的種類和使用注意事項(xiàng)有哪些

點(diǎn)擊: 次 時(shí)間:2017-06-03 10:02

一、微量比色皿的種類

1、短光程微量比色皿

此種比色皿的特點(diǎn)是比色池前后壁之間的距離很窄,所以注入的液體量相應(yīng)變小了,改變兩壁間的距離就可相應(yīng)改變樣品體積,已達(dá)到節(jié)省樣品或試劑的效果。

容積一般在100微升左右。

優(yōu)點(diǎn)是:由于池面受光面積很大,無需進(jìn)行光斑與池子間的擬合調(diào)整,安放到比色池架時(shí)很隨意,不用顧忌每次插拔比色池的位置的同一性;缺陷是清洗內(nèi)壁較為困難。

2、通用型微量池

這種微量比色皿的外形尺寸與普通標(biāo)準(zhǔn)池?zé)o二異,并且光程L仍保持10mm不變,只是在池子與光軸平行的兩側(cè)內(nèi)壁上粘貼了兩塊內(nèi)襯石英(或光學(xué))玻璃已達(dá)到減少池子容積的目的,這樣改變兩塊玻璃的厚度便可改變池子的容積。

此種池子的裝入樣品量大約在0.35~1mL間。

值得一提的是,通用型微量池分為兩種類型,主要區(qū)別在貼在池子兩壁上的內(nèi)襯玻璃的材料。一種是普通石英(或光學(xué)玻璃),其價(jià)格較為便宜;另一種是黑石英材料,價(jià)格較為昂貴,使用黑石英材料做內(nèi)襯的池子的優(yōu)點(diǎn)是:雜散光較少。

使用此種微量池的關(guān)鍵點(diǎn)是:使用前一定要檢查入射光斑是否正確地照射到光槽上,如果光斑打偏在內(nèi)襯玻璃上的話,將會(huì)產(chǎn)生很大的噪聲。此外由于儀器在制造時(shí),很難保證光軸與比色池架的垂直中心完全吻合,因此光斑難免會(huì)偏離微量池的光槽。為了保證光斑完全照射到光槽中,有的儀器在使用通用微量池時(shí)往往在池子的前面加裝一片遮光板,該遮光板的中央開一條縫隙,該縫隙與微量池的光槽的寬度一致,這樣就保證了光斑完全照射到光槽中了。

這種通用型微量池的優(yōu)點(diǎn)是:普及性很強(qiáng),基本可以配置在任何分光光度計(jì)上。同時(shí),國產(chǎn)池子的價(jià)格也不算貴,普遍受到使用者的歡迎。但是該池子與短距離微量池一樣有個(gè)相同的缺點(diǎn),那就是清洗時(shí)比較麻煩,使用一般的沖洗措施不易徹底洗凈池內(nèi)壁的殘留物,必須采用超聲波清洗器。

3、專用超微量比色皿

此種比色皿的容積均很小,一般進(jìn)樣量小于50微升,非常適合生物樣品及微量萃取樣品。這種池子的盛液槽很小且呈水平狀,改變?nèi)莘e的方法也是改變池子的光程L,即前后壁的距離。

此種比色皿的優(yōu)點(diǎn)除了進(jìn)樣量少之外,還有進(jìn)樣便捷和進(jìn)樣量易于控制(使用普通加樣槍即可)、清洗方便等特點(diǎn)。美中不足的是,由于使用該類型比色皿時(shí)要配備專用的池架,所以其價(jià)格較為昂貴。

備注:該池子在使用前,要做微量池、遮光板與光束的擬合,通過透過率或光強(qiáng)度的改變來監(jiān)控池架的正確位置,這個(gè)工作由圖中的調(diào)整螺釘來完成。

二、為何要使用微量比色皿

1、測試樣量稀少

出于種種原因,當(dāng)被檢測的樣品量一般少于1mL時(shí),如果仍然按照傳統(tǒng)的檢測方法(即將樣品放入到標(biāo)準(zhǔn)比色皿中檢測時(shí)),由于入射光束不能照射到或不能完全照射到樣品上,所以不能得到正確的檢測結(jié)果。其原因是:我們經(jīng)常使用的標(biāo)準(zhǔn)比色皿,規(guī)格為10×10mm,容積為4mL。

而入射光束的光斑一般均照射在比色皿的中部,換句話說、如果樣品少于1.5mL時(shí),從單色器發(fā)出的光束光斑是照射不到樣品上去的,何況區(qū)區(qū)的幾百微升的樣品呢?因此當(dāng)樣品量少時(shí)只能采用微量比色皿。

2、測試樣價(jià)格昂貴

有的標(biāo)準(zhǔn)試劑或標(biāo)樣的價(jià)格很貴,如果配制的測試樣品量過大會(huì)造成不必要的經(jīng)濟(jì)損失。

例如當(dāng)前比較熱門的DNA測試,其標(biāo)準(zhǔn)樣品每克的價(jià)錢大約1萬元人民幣。所以使用微量比色皿是勢在必行之舉。

三、使用微量比色皿的注意事項(xiàng)

1、無論何種微量池,在使用前一定要檢查比色池與光斑的擬合狀態(tài)。這點(diǎn)往往是使用者易于忽略的地方,結(jié)果造成測量值的重現(xiàn)性和噪聲水平變差。

2、由于微量池內(nèi)腔體的狹窄,故給清洗工作帶來較使用普通池更大的麻煩,這點(diǎn)需要使用者給予充足的重視。

(內(nèi)容參考儀器信息網(wǎng))

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