隨著人們生活水平的不斷提高，食品、醫(yī)藥、飲用品、化妝品等行業(yè)均需要微生物檢測(cè)。在微生物檢測(cè)中，需要了解微生物菌群的分離純化、培養(yǎng)、鑒定及保藏。

一、微生物純培養(yǎng)分離技術(shù)

獲得純培養(yǎng)物對(duì)微生物學(xué)研究至關(guān)重要，純培養(yǎng)物是指來(lái)源于同一單細(xì)胞的細(xì)胞群體。

從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過(guò)程稱(chēng)為微生物分離與純化。在分子生物學(xué)的研究及應(yīng)用中，不僅需要通過(guò)分離純化技術(shù)從混雜的天然微生物群中分離出特定的微生物，而且還必須隨時(shí)注意保持微生物純培養(yǎng)物的純潔，防止其他微生物的混入。

1、平板涂布法

因?yàn)閷⑽⑸飸乙合燃拥捷^燙的培養(yǎng)基中再倒平板易造成某些熱敏感菌的死亡，且采用稀釋倒平板法也會(huì)使一些嚴(yán)格好氧菌因被固定在瓊脂中間缺乏氧氣而影響其生長(zhǎng)，因此在微生物學(xué)研究中常用的純種分離方法是涂布平板法。

用途：一般多用于從菌種的純化；

優(yōu)點(diǎn)：可以觀察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)行分離；

缺點(diǎn)：不能計(jì)數(shù)。

2、平板劃線法

最簡(jiǎn)單的分離微生物的方法是平板劃線法，其原理是將微生物樣品在固體培養(yǎng)基表面多次作“由點(diǎn)到線”稀釋而達(dá)到分離目的的。劃線的方法很多，常見(jiàn)的比較容易出現(xiàn)單個(gè)菌落的劃線方法有斜線法、曲線法、方格法、放射法、四格法等。

用途：一般多用于篩選菌株。一般用于平板培養(yǎng)基的回收率計(jì)數(shù)。 

優(yōu)點(diǎn)：可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征。 

缺點(diǎn)：吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延。如果菌液密度大的話(huà)，長(zhǎng)不出單菌落。

二、大腸菌種的培養(yǎng)鑒定

大腸菌群能在乳糖膽鹽液體培養(yǎng)液中生長(zhǎng)，并且產(chǎn)氣產(chǎn)酸，使培養(yǎng)液變色。還能在伊紅美蘭固體培養(yǎng)上生長(zhǎng)，形成黑紫色的菌落，有的還有金屬光澤。其他病原菌的菌落呈粉紅色。再做鏡檢觀察是無(wú)芽孢的革蘭氏陰性桿菌（呈紅色）。即可鑒定是有大腸菌群的菌存在。

三、菌種保藏

菌種保藏是將微生物的菌種經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間的保存，不污染其它雜菌，及可保持其形態(tài)特征和生理性狀，減少變異，防止衰老，以便于將來(lái)使用。保藏菌種一般是選用它的休眠休，如孢子；芽孢等等，并且要?jiǎng)?chuàng)造一個(gè)低溫；干燥；缺氧；避光和缺少營(yíng)養(yǎng)的環(huán)境條件，以利于休眠體能長(zhǎng)期地處于休眠狀態(tài)。對(duì)于不產(chǎn)孢子的微生物，應(yīng)使其新陳代謝處于最低狀態(tài)，又不會(huì)死亡，從而達(dá)到長(zhǎng)期保存的目的。

（內(nèi)容來(lái)源實(shí)驗(yàn)與分析）