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實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法特點(diǎn)及適用范圍介紹
點(diǎn)擊: 次 時(shí)間:2017-03-16 10:55
實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)、微生物學(xué)常用儀器器材要進(jìn)行嚴(yán)格的消毒滅菌工作,滅菌工作的完成與否直接影響著整個(gè)實(shí)驗(yàn)?zāi)芊耥樌M(jìn)行。
目前,常用的消毒滅菌方法多采用物理方法(如干熱滅菌法、濕熱滅菌法、過(guò)濾除菌法、射線(xiàn)殺菌法等)和化學(xué)方法(消毒劑、抗生素)兩大類(lèi)。
1、干熱滅菌法
是利用恒溫干燥箱內(nèi)120℃~150℃的高熱,并保持90~120分鐘,殺死細(xì)菌和芽孢,達(dá)到滅菌目的的一種方法。主要適用于不便在壓力蒸汽滅菌器中進(jìn)行滅菌,且不易被高溫?fù)p壞的玻璃器皿、金屬器械以及不能和蒸汽接觸的物品的滅菌。用此方法滅菌的物品干燥,易于貯存。
酒精燈火焰燒灼滅菌法也是屬于干熱滅菌的方法之一,在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)工作時(shí),常須利用工作臺(tái)面上的酒精燈火焰對(duì)金屬器具及玻璃器皿口緣進(jìn)行補(bǔ)充滅菌。
2、濕熱滅菌法
壓力蒸汽濕熱滅菌法是目前最常用的一種滅菌方法。它利用高壓蒸汽以及在蒸汽環(huán)境中存在的潛熱作用和良好的穿透力,使菌體蛋白質(zhì)凝固變性而使微生物死亡。適合于布類(lèi)工作衣、各種器皿、金屬器械、膠塞、蒸餾水、棉塞、紙和某些培養(yǎng)液的滅菌。高壓蒸汽滅菌器的蒸汽壓力一般調(diào)整為1.0~1.1 kg/cm2,維持20~30min即可達(dá)到滅菌效果。
用高溫加高壓滅菌,不僅可殺死一般的細(xì)菌,對(duì)細(xì)菌芽胞也有殺滅效果,是最可靠、應(yīng)用最普遍的物理滅菌法,也可用于能耐高溫的物品,如金屬器械、玻璃、搪瓷、敷料、橡膠及一些藥物的滅菌。
3、射線(xiàn)滅菌法
利用紫外線(xiàn)燈進(jìn)行照射滅菌的方法。紫外線(xiàn)是一種低能量的電磁輻射,可以殺滅多種微生物。紫外線(xiàn)的作用機(jī)制是通過(guò)對(duì)微生物的核酸及蛋白質(zhì)等的破壞作用而使其滅活。適合于實(shí)驗(yàn)室空氣、地面、操作臺(tái)面滅菌。滅菌時(shí)間為30min。用紫外線(xiàn)殺菌時(shí)應(yīng)注意,不能邊照射邊進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,因?yàn)樽贤饩€(xiàn)不僅對(duì)人體皮膚有傷害,而且對(duì)培養(yǎng)物及一些試劑等也會(huì)產(chǎn)生不良影響。
4、過(guò)濾除菌法
是將液體或氣體通過(guò)有微孔的濾膜過(guò)濾,使大于濾膜孔徑的細(xì)菌等微生物顆粒阻留,從而達(dá)到除菌的方法。過(guò)濾除菌法大多用于遇熱易發(fā)生分解、變性而失效的試劑、酶液、血清、培養(yǎng)液等。
目前,常用微孔濾膜金屬濾器或塑料濾器正壓過(guò)濾除菌,或用玻璃細(xì)菌濾器、濾球負(fù)壓過(guò)濾除菌。濾膜孔徑應(yīng)在0.22~0.45μm范圍內(nèi)或用更小的細(xì)菌濾膜,溶液通過(guò)濾膜后,細(xì)菌和孢子等因大于濾膜孔徑而被阻,并利用濾膜的吸附作用,阻制小于濾膜孔徑的細(xì)菌透過(guò)。
5、化學(xué)消毒劑消毒法
用于那些不能利用物理方法進(jìn)行滅菌的物品、空氣、工作面、操作者皮膚、某些實(shí)驗(yàn)器皿等。常用的化學(xué)消毒劑包括甲醛、高錳酸鉀、70%~75%乙醇、過(guò)氧乙酸、來(lái)蘇爾水、0.1%新潔爾滅、環(huán)氧乙烷、碘伏或碘酊等。其中利用70%~75%乙醇、0.1%~0.2%氯化汞、10%次氯酸鈉、飽和漂白粉等進(jìn)行實(shí)驗(yàn)材料的滅菌;利用甲醛加高錳酸鉀[(2mL甲醛+1g高錳酸鉀)/m3]或乙二醇(6mL/m3)等加熱熏蒸法進(jìn)行無(wú)菌室和培養(yǎng)室的消毒。在使用時(shí)應(yīng)注意安全,特別是用在皮膚或?qū)嶒?yàn)材料上的消毒劑,須選用合適的藥劑種類(lèi)、濃度和處理時(shí)間,才能達(dá)到安全和滅菌的目的。
6、抗生素抑菌法
主要用于培養(yǎng)液,是培養(yǎng)過(guò)程中預(yù)防微生物污染的重要手段以及作為微生物污染不嚴(yán)重時(shí)的急救措施。常用的抗生素有青霉素、鏈霉素和新霉素等。
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