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液相色譜氨基柱做反相使用時(shí)的原理介紹
點(diǎn)擊: 次 時(shí)間:2017-03-13 10:46
液相色譜儀氨基柱在含水量多的情況下是很不穩(wěn)定的,也不宜在強(qiáng)酸的環(huán)境下使用。緩沖液則先用水/乙腈清洗再用乙腈,氨基柱其本質(zhì)屬于正相柱,使用氨基柱除了采用正相系統(tǒng)作為流動(dòng)相以外,一般還采用乙腈-水作為流動(dòng)相,但是要求乙腈的含量不得低于80%,含水過多的流動(dòng)相對(duì)氨基柱有損害,一般盡量不要用含水過多流動(dòng)相。建議用小流速的異丙醇沖洗過夜試試。
氨基柱是同時(shí)可以用于正相條件和反相條件的,這一點(diǎn)很多用戶都已經(jīng)知道。但是要注意到的是:正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的,對(duì)這一點(diǎn)的忽略可能會(huì)帶給使用者一些麻煩。NH2柱是在硅膠上鍵合一個(gè)5碳NH2;CN柱是在硅膠上鍵合一個(gè)5碳CN基;NH2.CN都為兩相柱。
對(duì)于新購(gòu)買到的柱子,首先請(qǐng)注意打開分析測(cè)試說明書,了解柱子的保存溶劑。如果保存溶劑與你將要使用的流動(dòng)相極性不同不會(huì)互溶,請(qǐng)先用異丙醇過渡。過渡過程中注意因異丙醇粘度較大,會(huì)導(dǎo)致柱壓很高,適當(dāng)調(diào)低流速即可。如果要使用的流動(dòng)相中還含有緩沖鹽類,建議在用分析流動(dòng)相之前,先用不含緩沖鹽的同比例流動(dòng)相過渡,這樣可避免緩沖鹽在分析柱內(nèi)的析出。反相條件下使用時(shí),要特別注意控制PH值范圍,PH值越低越有發(fā)生水解的危險(xiǎn),流動(dòng)相中水的比例越高當(dāng)然也越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)。所以,在使用后以及準(zhǔn)備長(zhǎng)時(shí)間放置該柱時(shí),必要的清洗和將氨基柱保存于純的有機(jī)溶劑中是很好的保養(yǎng)措施。
(內(nèi)容來源化驗(yàn)員之家)
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