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液相色譜儀氨基柱使用注意事項(xiàng)介紹
點(diǎn)擊: 次 時(shí)間:2017-03-11 11:19
一、液相色譜儀氨基柱正相使用清洗與保存
1.1 收到柱子后,如果使用正相的方法,可直接用流動(dòng)相平衡。用完后保存在異丙醇或正己烷中。
1.2 推薦先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積,再根據(jù)流動(dòng)相選用極性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速?zèng)_10倍柱體積,最后換成流動(dòng)相。
1.3 正相使用時(shí),不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用于還原糖的分析;流動(dòng)相要徹底脫氣,并不得含有羰基化合物和過(guò)氧化物(質(zhì)量不好的乙醚、四氫呋喃含有少量)。
1.4任何時(shí)候更換流動(dòng)相時(shí)都要確保新流動(dòng)相與柱子原保存液可互溶。
二、反相使用清洗與保存
2.1 由于新的LUNA 氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中,與反相流動(dòng)相是不互溶的,因此如果使用反相的方法,必須用異丙醇沖洗儀器管路,除去管路中的乙腈,甲醇或水,再必須用至少20倍柱體積的異丙醇沖洗過(guò)渡(約3h,0.5mL/min),以除去正相保存溶液。過(guò)渡過(guò)程中注意因異丙醇粘度較大,會(huì)導(dǎo)致柱壓很高,適當(dāng)調(diào)低流速即可。
再用至少10倍柱體積95%水-5%乙腈(或甲醇)沖洗(不含緩沖鹽的流動(dòng)相可省去),最后用流動(dòng)相平衡。
用完后洗柱時(shí),必須先用95%水沖洗至少10倍柱體積,除去所用緩沖鹽(不含緩沖鹽的流動(dòng)相可省去)。然后保存于乙腈/水(80:20)溶液中。長(zhǎng)期不用的話,建議用異丙醇保存。
2.2 任何時(shí)候更換流動(dòng)相時(shí)都要確保新流動(dòng)相與柱子原保存液可互溶,并不會(huì)導(dǎo)致鹽結(jié)晶。
三、其它注意事項(xiàng)
3.1 反相條件下使用時(shí),要特別注意控制pH值范圍,pH值越低越有發(fā)生水解的危險(xiǎn),流動(dòng)相中水的比例越高當(dāng)然也越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)。LUNA 氨基柱pH范圍為1.5-11.0,能耐100%水。
3.2 有一種情況是,當(dāng)使用氨基柱進(jìn)行酸性物質(zhì)的分析時(shí),酸性物質(zhì)的存在意味著質(zhì)子的存在,可能會(huì)使略帶負(fù)電荷的氨基官能團(tuán)質(zhì)子化,導(dǎo)致使用一段時(shí)間后對(duì)于某些類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。建議:用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱(沖洗后當(dāng)然要再用不含堿的流動(dòng)相洗去多余氨),之后再進(jìn)行分析這類酸性分析物時(shí)建議在流動(dòng)相中略微添加少許氨如0.1%。
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