無論何種檢測器，流通池的設計結構和部件都非常重要，其體積和構型直接影響檢測器的靈敏度。正確認識流動池的結構、原理、使用和選擇，對于色譜檢測有著重要的意義。

本文主要說明不同體積的流通池對于色譜檢測造成的影響。

一、流通池的體積對檢測限和分辨率的影響

    使用較大的流通池可獲得最佳的檢測限。使用較小的流通池可以獲得最佳的峰分辨率。

    較大的流通池，光通量和光程相比較大一些，樣品通過流通池時，光敏元件上就會得到比較大的光強，并且由于光程較大，所以靈敏度就會比較高，靈敏度的增大更有利于得到較好的檢測限。

    較小的流通池雖然光通量較弱，但由于池徑較小，光程較短，因此樣品在流通池內(nèi)的擴散較小，使峰的分辨率得到提高。

    為了提高靈敏度，減小池內(nèi)色譜峰擴展，要求流通池長而內(nèi)徑小，池體積愈小愈好。增加池的光程會使檢測靈敏度增大，但光程的提高有一定的限制。為了降低池體積引起的峰擴展，當光程增加時，樣品池的內(nèi)徑必須減少，但結果導致光敏元件上光照減少，使信噪比降低。所以兩種效果是矛盾的。除非在光敏元件上有很低的內(nèi)在噪音水平，否則提高靈敏度的程度有一定局限。

    因此，流通池的池體積是影響檢測器靈敏度和分辨率的主要因素，欲得到滿意的靈敏度和分辨率應根據(jù)色譜柱的柱徑選擇合適的池體積。

二、流通池體積對線性范圍的影響

    根據(jù)比耳定律，吸光物質的吸光度與流通池的光程長度和濃度成正比。

    當光程一定時，在檢測波長下，給定的吸光物質的吸光度只與其摩爾濃度成正比，因此可以通過測定待測組分的在檢測波長下的噪聲，根據(jù)2倍噪聲求出最小檢測濃度，進而求出最小檢測量。最小檢測濃度是考驗儀器的靈敏度的參數(shù)。最小檢測濃度數(shù)值大，儀器的靈敏度就小，不能反應真正的噪音和漂移水平。

根據(jù)上述公式也可以看出，檢測器流通池的光程越大，檢測限越小。定量分析的準確度很大程度上取決于濃度檢測線性范圍。在該線性范圍內(nèi)具有良好的線性，其上限受色譜柱容量的限制，若使用大容量的色譜柱，線性范圍會更大。

    當流通池的體積一定時，靈敏度隨1/d的增加而增高，在考慮流動相干擾并保證光通量的前提下，應盡可能選擇長光程流通池，檢測壓力及溫度也影響系統(tǒng)分辨率，在較高壓力及溫度下色譜分離較好。

三、流通池光程長度和池內(nèi)徑對靈敏度和信噪比的影響

      池體積確定后，還必須選擇適當?shù)墓獬涕L度L和池內(nèi)徑d，根據(jù)朗伯-比耳定律

    根據(jù)朗伯-比耳定律ξ，m為吸光系數(shù)和樣品質量，據(jù)上式可知，吸光物質的質量m一定時，吸光度A與池徑的平方成反比。樣品質量及池體積一定時，吸光度A與光程l成正比。故選擇高1/d比值的流通池有利于增加吸光度，提高檢測的靈敏度。但1/d也不宜過大，因為：1：1/d過大，光損失增加，光通量減小。2：光程L愈大，流動相的干擾吸收愈大。

    流通池光程越長，生成的信號越高。盡管通常增加光程會使噪聲提高，但噪音提高幅度很小，信噪比還是會增大。

四、池體積對靈敏度的影響

    流通池體積大小也是色譜檢測的關鍵，當最窄半峰寬色譜峰體積的1/3等于流通池體積時，方能得到最佳靈敏度，最窄半峰寬色譜峰的體積與柱徑柱長 柱效及色譜分離條件有關，其中柱徑是決定最窄半峰寬色譜峰體積的主要因素，當其它條件不變時，柱徑越大，最窄半峰寬色譜峰的體積也愈大，因此，要得到滿意的色譜峰效果，必須選擇合適的柱徑和池體積。若池體積太大，不僅會降低靈敏度，而且還會影響系統(tǒng)分辨率。

五、峰寬（響應時間）的設置對信噪比的影響

    響應時間增加一倍，采集頻率降低一倍，而峰寬增加一倍，因此峰寬的設置，也就影響到響應時間的變化，峰寬參數(shù)設置太大，采集頻率太低，會使峰失真，影響信噪比和分離度。檢測器響應時間不影響色譜峰面積和峰形對稱度，但增加檢測器響應時間，可以明顯減小檢測器短期噪聲，導致色譜峰峰高降低、峰形變寬（尤其對弱保留組分的尖銳色譜峰作用顯著），信噪比增大，也使線性范圍擴大。

    隨著檢測器響應時間設置的增大，檢測器短期基線噪聲明顯減小，峰高略有下降，因此信噪比增大，檢測限降低，而線性范圍的上限變化不大。因此，適當增大檢測器響應時間不僅可以得到低的檢測限，也可使線性范圍變寬。但是，隨著檢測器響應時間的增加，同時也會帶來其他的問題，隨著濾波常數(shù)的增加，峰高有減小趨勢。在同一組實驗中，濾波常數(shù)對保留時間小的組分的影響較大，組份出峰越晚，所受影響越小，對于有較大保留的組分幾乎無影響。由于出峰早的組分，所得到的色譜峰峰寬較窄，峰形尖銳，也即其中所包含的信號頻率較高，通過調(diào)整適當響應時間可以將其中的一部分高頻信號濾掉，而使其原有的信號值改變。強保留組分出峰較晚，所得到的色譜峰展寬嚴重，其中所包含的信號頻率相對較低，通過調(diào)節(jié)響應時間來濾除高頻信號將不很明顯。理想的響應時間取決于色譜峰寬。

    理想的響應時間取決于色譜峰寬，將峰寬設置為盡可能接近于色譜圖中目標窄峰的寬度，流通池的體積應接近于最窄峰體積的1/3（最窄峰半峰高處峰寬乘于流速1/3）， 增加光程會使流通池的體積增加，峰寬也會增加，但不影響梯度中的分離度。

六、選擇樣品波長

應選擇大于流動相截止波長，如果要獲得最低的可能檢測限，應選擇分析物最強吸收處的波長，如果使用高濃度進行分析，則應選擇中等吸收的波長，并且最好選擇光譜平坦的區(qū)域以獲得較好的線性。

（內(nèi)容來源液相色譜之家）