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高效液相色譜儀一般操作步驟介紹

點擊: 次 時間:2017-02-09 10:26

    本文主要說明高效液相色譜儀的一般操作步驟。

1、過濾流動相,根據(jù)需要選擇不同的濾膜。

2、對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10~20分鐘。

3、打開HPLC工作站(包括計算機軟件和色譜儀),連接好流動相管道,連接檢測系統(tǒng)。

4、進入HPLC控制界面主菜單,點擊manual,進入手動菜單。

5、有一段時間沒用,或者換了新的流動相,需要先沖洗泵和進樣閥。沖洗泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖洗進樣閥,需要在manual菜單下,先點擊purge,再點擊start,沖洗時速度不要超過10mL/min。

6、調(diào)節(jié)流量,初次使用新的流動相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,一般不要超過2000。

7、設(shè)計走樣方法。點擊file,選取select usersandmethods,可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個新的方法,點擊new method。選取需要的配件,包括進樣閥,泵,檢測器等,根據(jù)需要而不同。

選完后,點擊protocol,一個完整的走樣方法需要包括:

a.進樣前的穩(wěn)流,一般2~5分鐘;

b.基線歸零;

c.進樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換;

d.走樣時間,隨不同的樣品而不同。

8、進樣和進樣后操作。選定走樣方法,點擊start。進樣,所有的樣品均需過濾。方法走完后,點擊postrun,可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后,再用上面的方法走一段基線,洗掉剩余物。

9、關(guān)機時,先關(guān)計算機,再關(guān)液相色譜。

10、填寫登記本,由負責(zé)人簽字。

 在操作時要注意以下事項:

1、流動相均需色譜純度,水用20M的去離子水。脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡。

2、柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要讓液體過柱子。

3、所有過柱子的液體均需嚴格的過濾。

4、壓力不能太大,最好不要超過2000psi。

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