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微生物日常檢驗(yàn)過(guò)程中的注意事項(xiàng)介紹
點(diǎn)擊: 次 時(shí)間:2017-01-22 10:32
在微生物檢驗(yàn)操作過(guò)程中,要保證檢測(cè)環(huán)境及所用工器具的潔凈程度,同時(shí)保證人員各種操作的規(guī)范性,盡量保證其無(wú)菌性,防止因人為原因操作失誤而出現(xiàn)誤差結(jié)果,同時(shí)在適宜溫度進(jìn)行培養(yǎng),為合理決策和指導(dǎo)生產(chǎn)提供依據(jù)。
為保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,我們應(yīng)做好以下幾個(gè)方面。
一、培養(yǎng)基的滅菌及使用
1.每次配制時(shí),要注意其生產(chǎn)日期是否在保質(zhì)期內(nèi),查看其開瓶日期及瓶口密封性,保證其未變質(zhì),并且未吸潮。
2.培養(yǎng)基配制時(shí),稱量要準(zhǔn)確,包括鹽水的分裝要準(zhǔn)確。
3.一定要保證現(xiàn)配制現(xiàn)滅菌,未滅菌的配好培養(yǎng)基不能長(zhǎng)時(shí)間放置,更不可隔夜。
4.滅菌時(shí)要保證恒溫、恒壓,同時(shí)要保證有效的滅菌時(shí)間。
5.滅菌過(guò)的培養(yǎng)基要冰箱保存,可保存一周,一般不超過(guò) 3 天。而且要遵循“先入先出”原則,先配制的要先使用。
6.在使用時(shí),要根據(jù)當(dāng)班次的使用量,用水浴鍋先將培養(yǎng)基溶化為液態(tài),然后及時(shí)調(diào)低水浴溫度(先化好的可從水浴取出,放在水浴鍋鍋蓋上)待用,千萬(wàn)不可長(zhǎng)時(shí)間使培養(yǎng)基處于高溫狀態(tài)。
7.做產(chǎn)品微生物檢測(cè)時(shí),傾倒培養(yǎng)基溫度在 45℃左右,不可過(guò)燙,避免將菌燙死;也不可過(guò)涼,化好的培養(yǎng)基又結(jié)塊凝固,不便于觀察結(jié)果。
8.每瓶培養(yǎng)基均要做空白。
9.盡量集中做樣,避免頻繁打開同一瓶培養(yǎng)基瓶塞,增大培養(yǎng)基的污染幾率,出現(xiàn)誤差結(jié)果。
10.培養(yǎng)基剩余過(guò)少時(shí),可先將其傾倒成空白用板。
二、檢測(cè)環(huán)境的維持
1、大環(huán)境(檢測(cè)室)
檢測(cè)時(shí),窗戶和空調(diào)要關(guān)閉,或用酒精對(duì)房間進(jìn)行噴霧消毒,避免房間內(nèi)空氣流通影響超凈臺(tái)內(nèi)部環(huán)境(最好在有通排風(fēng)系統(tǒng)的恒溫恒濕無(wú)菌間進(jìn)行操作)。
如果在原來(lái)的原料微生物檢測(cè)室進(jìn)行檢測(cè),要定期開啟紫外燈,對(duì)房間進(jìn)行殺菌。
2、小環(huán)境(超凈工作臺(tái))
定期清潔初效過(guò)濾器,要及時(shí)更換。
檢測(cè)前,將超凈臺(tái)內(nèi)部進(jìn)行清潔,用 75%酒精進(jìn)行擦拭消毒,并提前半小時(shí)將超凈臺(tái)紫外燈打開,對(duì)超凈臺(tái)內(nèi)部環(huán)境進(jìn)行殺菌。
關(guān)紫外燈,開風(fēng)機(jī),調(diào)整合適進(jìn)風(fēng)量,風(fēng)量不可過(guò)低。
每次檢測(cè)后,要對(duì)超凈臺(tái)內(nèi)部進(jìn)行清理、清潔,并用75%酒精進(jìn)行擦拭消毒。
紫外燈根據(jù)其使用壽命要及時(shí)更換。
檢測(cè)同時(shí),要做上相應(yīng)菌落檢測(cè)的環(huán)境空白。
檢測(cè)區(qū)域的選擇:
a、一般在距離超凈臺(tái)外沿的 1/3-2/3 區(qū)域進(jìn)行無(wú)菌操作;
b、要在酒精燈火焰的外焰保護(hù)區(qū)域進(jìn)行操作。
三、工器具的潔凈度
1.玻璃器皿:采用干熱滅菌方式進(jìn)行滅菌。
2.檢測(cè)用剪刀、勺子等物品要做到檢測(cè)專用,不可與其它操作器具混用,使用時(shí),先用75%酒精消毒,再采用灼燒方式進(jìn)行滅菌。
3.接種針(環(huán))采用灼燒方式進(jìn)行滅菌,但要注意檢測(cè)時(shí)要先將接種針(環(huán))進(jìn)行冷卻。
四、樣品的采集及檢測(cè)
1、保證采樣器具的無(wú)菌性
玻璃器皿:采用干熱滅菌方式進(jìn)行滅菌,保證恒溫、時(shí)間足夠(但不可時(shí)間過(guò)長(zhǎng),容易導(dǎo)致玻璃器皿易裂紋而報(bào)廢)。
取樣筐:使用前要用75%酒精進(jìn)行噴灑消毒。
取樣勺:要保證其清潔消毒,清潔后用75%酒精進(jìn)行擦拭消毒。
取樣袋:可先用酒精進(jìn)行擦拭消毒,再在超凈臺(tái)用紫外燈照射消毒,(包裝車間要在傳遞窗用紫外燈照射消毒)。
電子天平表面用75%酒精消毒。
2、人員操作
保證手部的清洗、消毒:取樣前及檢測(cè)前都要先洗手再消毒。
取樣要具有代表性(隨機(jī)樣、目的樣、綜合樣)且要標(biāo)示清楚。
取樣完畢,不可在車間逗留,要及時(shí)將樣品放入超凈臺(tái),對(duì)其外表面進(jìn)行紫外燈照射消毒。
在要求的檢測(cè)區(qū)域進(jìn)行操作。
檢測(cè)前,要用 75%酒精棉球?qū)悠反诓窟M(jìn)行擦拭消毒,再開口。
往鹽水瓶加樣品時(shí),要注意勺子或袋子盡量不接觸瓶口。
樣品計(jì)量要準(zhǔn)確,稀釋倍數(shù)也要準(zhǔn)確(1mL 吸管不允許將管口敲掉),進(jìn)行100 倍稀釋時(shí),1mL 吸管要伸入鹽水中,不可以將樣品從管壁流下去,同時(shí)要避免將管底部捅破。
鹽水溫度以40℃左右為宜,不能過(guò)熱,會(huì)將部分微生物燙死;也不能溫度太低,不能將樣品溶解完全。
進(jìn)行稀釋時(shí),要搖勻,保證溶液的均一性。
傾倒平皿時(shí),要注意培養(yǎng)基瓶口不要接觸到平皿;傾倒的培養(yǎng)基要適量,不可以太少,在培養(yǎng)過(guò)程中易干掉,微生物亦死亡,以 15mL 左右為宜。
做大腸菌群樣時(shí),要提前將乳糖膽鹽培養(yǎng)基培養(yǎng)管按需要量備好,放入超凈臺(tái)對(duì)外表面進(jìn)行紫外線滅菌。
接二步時(shí),要注意先將接種針(環(huán))進(jìn)行冷卻,避免出現(xiàn)接不上菌落的情況,導(dǎo)致無(wú)法判斷、確認(rèn)。
檢測(cè)完畢,及時(shí)放入相應(yīng)培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng),并清理清潔超凈臺(tái)。
五、微生物的培養(yǎng)
1.在培養(yǎng)過(guò)程中,要隨時(shí)監(jiān)控培養(yǎng)箱溫度,保證其在適宜的溫度進(jìn)行培養(yǎng)。
2.要按照《微生物檢驗(yàn)規(guī)范》要求及時(shí)觀察結(jié)果,出現(xiàn)異常,要及時(shí)分析原因進(jìn)行反饋。
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