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色譜柱的再生和維護(hù)規(guī)程

點擊: 次 時間:2016-11-18 09:36

 一、色譜柱的再生
    色譜柱的再生因為色譜柱是消耗品，隨著使用時間或進(jìn)樣次數(shù)的增加，會出現(xiàn)色譜峰高降低，峰寬加大或出現(xiàn)肩峰的現(xiàn)象，一般來說可能是柱效下降。
（1）反相柱的再生：
    依次采用20～30倍的色譜柱體積的甲醇：水=10：90（V/V），乙腈，異丙醇作為流動相沖洗色譜柱，完成后再以相反順序沖洗色譜柱。
（2）正相柱的再生：
    依次以20～30倍色譜柱的體積的正己烷、異丙醇、二氯甲烷、甲醇作為流動相沖洗色譜柱，然后再以相反的順序沖洗色譜柱。要注意上述溶劑必須嚴(yán)格脫水。
進(jìn)行色譜柱再生時，應(yīng)使用一個謙價的泵，我們建議最好不使用您的高效液相色譜儀上的泵。
注意：在對NH2改性的色譜柱進(jìn)行再生時，由于NH2可能成銨根離子的形式存在，因此，應(yīng)該在水洗后用0.1M的氨水沖洗，然后再用水沖洗至堿溶液完全流出。如果簡單的有機溶劑/水的處理不能夠完全洗去硅膠表面吸附的雜質(zhì)，用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。
二、色譜柱的維護(hù)
1.使用預(yù)柱保護(hù)分析柱（硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度）；
2.大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2～7.5，盡量不超過該色譜柱的pH范圍；
3.避免流動相組成及極性的劇烈變化；
4.流動相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理；
5.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相，應(yīng)在實驗完畢柱子沖洗干凈，并保存大乙腈中；
6.壓力升高是需要更換預(yù)柱的信號。
 
 


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