一、外標(biāo)法的概念

外標(biāo)法又稱標(biāo)準(zhǔn)曲線法，依照測量標(biāo)準(zhǔn)品所繪制的曲線計(jì)量被測樣品含量的方法。

外標(biāo)法是用待測組分的純品作對照物質(zhì)。此法可分為工作曲線法及外標(biāo)一點(diǎn)法等。工作曲線法是用對照物質(zhì)配制一系列濃度的對照品溶液確定工作曲線，求出斜率與截距。準(zhǔn)確進(jìn)樣與對照品溶液相同體積的樣品溶液，根據(jù)待測組分的信號，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其濃度或用回歸方程計(jì)算，工作曲線法也可用外標(biāo)二點(diǎn)法代替。

二、外標(biāo)法的優(yōu)缺點(diǎn)

優(yōu)點(diǎn)：
  簡單、適合大量樣品分析；

缺點(diǎn)：

  每次色譜條件很難相同，容易出現(xiàn)誤差；

  我們作體外藥物分析時均采用外標(biāo)法，體內(nèi)藥物分析，因提取步驟煩瑣，都采用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行校正，但如果儀器穩(wěn)定、方法的重現(xiàn)性好，也可使用外標(biāo)法，國外體內(nèi)藥物分析用外標(biāo)法的也有不少，但小析姐認(rèn)為最好使用內(nèi)標(biāo)法。

實(shí)際樣品檢測用外標(biāo)法的更多，原因如下：

1.內(nèi)標(biāo)物難獲得，特別是同位素標(biāo)記的有相近行為的內(nèi)標(biāo)物；

2.操作步驟多、計(jì)算煩瑣；

如，在新藥報(bào)批中使用內(nèi)標(biāo)物，則需報(bào)送內(nèi)標(biāo)物的結(jié)構(gòu)確證資料，在報(bào)生產(chǎn)的同時還要報(bào)送此內(nèi)標(biāo)物對照品。所以，現(xiàn)在連SDA的專家都不推薦使用內(nèi)標(biāo)法。

最初使用內(nèi)標(biāo)是因?yàn)檫M(jìn)樣器進(jìn)樣不準(zhǔn)確，采用內(nèi)標(biāo)可以校正進(jìn)樣誤差?，F(xiàn)在的HPLC用定量環(huán)進(jìn)樣準(zhǔn)確度很高，加了內(nèi)標(biāo)有時候因?yàn)椴僮鞯恼`差反而降低準(zhǔn)確度。在藥物質(zhì)量檢驗(yàn)中，如果是原料藥，或者制劑的成份不多，用外標(biāo)法即可，不一定非要用內(nèi)標(biāo)法，并且目前越來越多的標(biāo)準(zhǔn)均放棄使用內(nèi)標(biāo)法。

對于體內(nèi)藥物分析，分析方法的誤差反而不重要，而在樣品處理過程中引入的誤差要引起足夠的重視，所以，一般在處理過程中加入內(nèi)標(biāo)以校正誤差。此時，回收率的高低要求并不高，雖然要求絕對回收率在70%或80%以上，但是，有時低一些也無所謂，關(guān)鍵是回收率的穩(wěn)定性、測定的重現(xiàn)性。

三、定量分析中怎樣選擇內(nèi)標(biāo)法或外標(biāo)法

內(nèi)標(biāo)與外標(biāo)都是氣相色譜儀?定量的一種方法而已，至于方法的好壞不能一概而論，做不同的分析，面對不同的要求，再加上分析成本、分析效率等問題，簡單而有效進(jìn)行定量分析滿足要求才最重要。

1、從前做過很多醫(yī)藥、農(nóng)藥中間體的芳香族鹵代化合物的常量定量分析，沒有自動進(jìn)樣器，用外標(biāo)法定量，確實(shí)重現(xiàn)性與穩(wěn)定性非常差，結(jié)果經(jīng)常受到搞合成同事的質(zhì)疑。

2、上面已經(jīng)提到當(dāng)做方法驗(yàn)證的時候，當(dāng)同一樣品配制6個樣品溶液用所選用的外標(biāo)法進(jìn)行定量的時候，RSD都滿足1.5%的要求時，也分為兩種情況，小于1%和大于1%，小于1.5%。

3、對于微量分析，比如農(nóng)藥和獸藥殘留的分析、環(huán)境分析等，根據(jù)不同的限量標(biāo)準(zhǔn)要求對于精密度的要求也比常量分析的要求要寬松的多，RSD有時可以允許達(dá)到10%甚至更高，這時可能外標(biāo)法有更大的應(yīng)用空間。

4、單從精密度方面去考慮，排除其它成本和效率的因素，個人認(rèn)為還是內(nèi)標(biāo)優(yōu)于外標(biāo)。

應(yīng)用外標(biāo)法能夠滿足要求，首選還是外標(biāo)法了，畢竟簡單而省事。對于精密度要求比較高、結(jié)果準(zhǔn)確度會產(chǎn)生重大影響、實(shí)驗(yàn)室條件不是很理想的等等條件下，用內(nèi)標(biāo)法還是必要的。無論應(yīng)用那種方法，方法的驗(yàn)證和確認(rèn)都是很重要的，只要是按照程序經(jīng)過驗(yàn)證和確認(rèn)的方法，都有其應(yīng)用的空間。

（文章參考實(shí)驗(yàn)與分析網(wǎng)）?